Скачать или смотреть Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) — мощный молекулярно-цитогенетический метод

Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH) — это мощный молекулярно-цитогенетический метод, используемый для обнаружения и локализации специфических последовательностей ДНК или РНК на хромосомах или внутри клеток с помощью флуоресцентных зондов. Он сочетает молекулярную биологию с микроскопией для одновременного получения пространственной и генетической информации.

🔬 Как работает FISH
Подготовка образцов: Клетки или срезы тканей фиксируются на предметном стекле микроскопа.

Денатурация: ДНК денатурируется, превращаясь в одноцепочечную.

Гибридизация: Флуоресцентно меченые ДНК- или РНК-зонды применяются для связывания (гибридизации) с комплементарными последовательностями.

Отмывание: Избыток зондов смывается.

Детекция: Флуоресцентные сигналы визуализируются под флуоресцентным микроскопом, выявляя наличие, отсутствие или местоположение специфического генетического материала.

🧬 Основные области применения FISH
1. Медицинская диагностика
Выявление рака: выявление хромосомных аномалий, таких как транслокации, делеции или амплификации (например, HER2 при раке молочной железы, BCR-ABL при лейкемии).

Генетические заболевания: выявление микроделеций (например, синдром Ди Джорджи), анеуплоидий (например, синдром Дауна) и других хромосомных аномалий.

Пренатальное тестирование: экспресс-скрининг распространённых хромосомных аномалий в клетках плода.

2. Микробиология
Идентификация патогенов: обнаружение специфических бактериальных или вирусных ДНК/РНК в клинических образцах или образцах окружающей среды.

Микробная экология: изучение микробных сообществ путём анализа последовательностей рибосомной РНК.

3. Исследования и цитогенетика
Картирование генов: локализация генов на хромосомах для изучения генома.

Исследование хромосомных перестроек: анализ структурных изменений хромосом.

Локализация трансгена: подтверждение мест вставки в генетически модифицированных организмах.

4. Репродуктивная медицина
Анализ спермы: оценка целостности хромосом в сперматозоидах для оценки фертильности.

✅ Преимущества
Высокая специфичность и чувствительность.

Визуализирует генетический материал в его клеточном контексте.

Применимо к неделящимся (интерфазным) и делящимся (метафазным) клеткам.

⚠️ Ограничения
Невозможно обнаружить очень мелкие мутации (например, точечные).

Требуется предварительное знание целевой последовательности для разработки специфических зондов.

#Гибрид