¿Qué es y cómo se utiliza CRISPR-Prime Editing? 🧬

✅ Presento un ejemplo de cómo editar el ADN utilizando CRISPR Cas9 y CRISPR Prime Editing.

El Prime Editing es una técnica muy reciente para edición de precisión con menos limitaciones, con el potencial de eliminar muchas enfermedades hereditarias en las próximas décadas. Aquí, por primera vez en internet, presento una explicación de su funcionamiento en detalle.

Tags: #biotecnologia #crispr

⭐ Todos los videos sobre CRISPR-Cas9 ▷ http://bit.ly/crispr-playlist


0:00 Funcionamiento de CRISPR-Cas9
0:30 Cómo reparar genes con CRISPR
2:04 Problemas técnicos con CRISPR
4:14 Sobre el Alzheimer
5:44 Que es Prime Editing
6:43 Prime Editing paso a paso
7:50 Proceso de diseño
9:30 ???

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Aquí una lista de lo que normalmente se considera para diseñar el pegRNA para Prime Editing, y unos cuantos consejos:
1️⃣ pegRNA spacer (validar como típico ARN guía)
2️⃣ Primer Binding Site (PBS; validar como primer para PCR)
3️⃣ Reverse Transcriptase Template (puede ser cualquier tamaño, pero evitar oligos con el PBS)
4️⃣ ngRNA (nicking guide RNA; validar como típico ARN guía)

🔧 Herramientas y links 🔧
▷ Cas-OFF finder (Para validación informática): http://www.rgenome.net/cas-offinder/
► CHOPCHOP (para diseño de ARN guía): chopchop.cbu.uib.no/
► eCRISPR (para diseño de ARN guía): http://www.e-crisp.org/E-CRISP/
MultiCRISPR (para diseño de ARN guía): https://multicrispr.net/

📚 Referencias y lecturas recomendadas 📚

[ARTÍCULOS]
▷ Edición por recombinación homologa usando plantillas con histonas: https://elifesciences.org/articles/55780
▷ Estrategias para inimización de off-targets: https://www.mdpi.com/2073-4409/9/7/1608
▷ Otras estrategias para no usar plantillas: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/f...
▷ Estrategias para mejorar el HDR:
https://www.frontiersin.org/articles/...
► Artículo sobre funcionamiento de Prime Editing: https://www.frontiersin.org/articles/...
▷ Sobre CRISPR-Cas y enzimas relacionadas: https://www.sciencedirect.com/science...

[RECOMENDADÍSIMO]
Libros gratis para aprender más del diseño de vectores virales para terapia génica y otros.
► AddGene: https://www.addgene.org/educational-r...