Скачать или смотреть Методы амплификации ДНК: основные инструменты молекулярной биологии

Методы амплификации ДНК позволяют создавать миллионы копий определённой последовательности ДНК, что позволяет проводить детальный анализ даже на основе крошечных образцов. Эти методы незаменимы в диагностике, судебной экспертизе, исследованиях и биотехнологии.

Вот краткое описание наиболее распространённых методов амплификации ДНК и их применения:

🔬 1. Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Наиболее распространённый метод амплификации ДНК.

Использует циклы нагревания и охлаждения для денатурации ДНК, отжига праймеров и наращивания новых цепей.

Области применения: генетическое тестирование, обнаружение патогенов, судебно-медицинская экспертиза и клонирование.

⚡ 2. ПЦР в реальном времени (кПЦР)
Мониторинг амплификации ДНК в реальном времени с помощью флуоресцентных красителей или зондов.

Количественное определение ДНК делает этот метод идеальным для измерения экспрессии генов или вирусной нагрузки.

Области применения: тестирование на COVID-19, количественное определение онкологических биомаркеров и фармакогеномика.

🧊 3. ПЦР с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР)
Преобразует РНК в ДНК с помощью обратной транскриптазы перед амплификацией.

Применение: Выявление РНК-содержащих вирусов (например, ВИЧ, SARS-CoV-2), изучение экспрессии генов.

🧪 4. Методы изотермической амплификации
Эти методы амплифицируют ДНК при постоянной температуре, что исключает необходимость циклического изменения температуры.

a. Петлевая изотермическая амплификация (LAMP)
Быстрый и высокоспецифичный метод.

Применение: Диагностика на месте оказания медицинской помощи, особенно в условиях ограниченных ресурсов.

b. Рекомбиназная полимеразная амплификация (RPA)
Работает при температуре тела.

Применение: Полевая диагностика, тестирование безопасности пищевых продуктов.

🧬 5. Эмульсионная ПЦР
Молекулы ДНК амплифицируются в каплях воды в масле.

Используется в платформах секвенирования нового поколения (NGS), таких как Ion Torrent.

Области применения: высокопроизводительное секвенирование, выявление мутаций.

🧬 6. Мостовая амплификация
Фрагменты ДНК связываются с поверхностью и образуют мостики для амплификации.

Используется в секвенировании Illumina.

Области применения: секвенирование всего генома, транскриптомика.

🧬 7. Амплификация ДНК с использованием наношариков
Производит компактные наношарики ДНК для секвенирования.

Используется в платформах секвенирования BGI.

Области применения: крупномасштабные геномные исследования.

🧫 8. Амплификация по принципу катящегося кольца (RCA)
Амплифицирует кольцевые ДНК-матрицы.

Области применения: анализ плазмид, обнаружение вирусного генома, биосенсоры.

🧠 Почему важна амплификация ДНК
Позволяет проводить раннее выявление заболеваний из минимальных образцов.

Поддерживает генетические исследования, судебно-медицинскую экспертизу и инновации в области биотехнологий.

#Усиление