Скачать или смотреть Цикл ПЦР (полимеразной цепной реакции): денатурация, отжиг, удлинение

Цикл ПЦР представляет собой повторяющиеся этапы изменения температуры, позволяющие амплифицировать ДНК экспоненциально. Каждый цикл состоит из трёх основных стадий: денатурации, отжига и удлинения. Эти этапы обычно повторяются в течение 25–40 циклов в зависимости от задачи.

🔁 Этапы цикла ПЦР
Денатурация (94–98 °C)

Двухцепочечная ДНК плавится, раскрываясь в одноцепочечные цепи.

Это обеспечивает праймерам и полимеразе доступ к ДНК-матрице.

Отжиг (50–65 °C)

Праймеры связываются (отжигаются) со своими комплементарными последовательностями на одноцепочечной ДНК.

Температура зависит от температуры плавления праймера (Tm).

Удлинение (72 °C)

ДНК-полимераза синтезирует новые цепи ДНК, добавляя dNTP к праймерам.

Taq-полимераза работает оптимально при этой температуре.

🔄 Повторение цикла
Эти три этапа повторяются 25–40 раз.

Каждый цикл удваивает количество целевой ДНК, что приводит к экспоненциальной амплификации.

🧪 Заключительный этап: Удерживание
После циклирования можно добавить финальную элонгацию при 72°C в течение 5–10 минут.

Затем реакцию выдерживают при 4°C для сохранения амплифицированной ДНК.

#полимеразнаяцепнаяреакция